Днк ureaplasma urealyticum обнаружено что это значит: Ureaplasma parvum, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Содержание

ДНК уреаплазмы (Ureaplasma urealyticum) в лаборатории KDL

Выберите требуемый вид биоматериала

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если необходимо получить соскоб из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 — 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Мокроту можно собрать только при наличии кашля! Перед сбором мокроты рекомендуется почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой.

Избегать попадания в мокроту слюны и носовой слизи. Мокрота по мере откашливания собирается в стерильный контейнер. Кашель можно вызвать с помощью нескольких глубоких вдохов.

Первая порция утренней мочи собирается после тщательного туалета наружных половых органов. Перед исследованием не применять местно антибактериальное мыло и антисептические средства.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Накануне исследования не применять местные лекарственные препараты и процедуры, исключить половой акт. При взятии соскоба из уретры не мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Материал рекомендуется собирать до местного применения антибиотиков или антисептиков, до еды, (или не менее чем через 2 часа после еды), можно утром натощак (воду пить и чистить зубы можно).

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Пациент собирает материал самостоятельно путем мастурбации в стерильный контейнер.

Смешанный соскоб урогенитального тракта не берется на фоне местной терапии (свечи, мази, спринцевания) и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ или полового контакта должно пройти 48 часов. Если есть необходимость взятия материала из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 — 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование возможно через 14-21 день после окончания приема антибиотиков.

Соскобы из урогенитального тракта не берутся в течение суток после местной терапии (свечи, мази, спринцевания), после полового контакта и во время менструации у женщин. После кольпоскопии, интравагинального УЗИ должно пройти 48 часов. В случае наличия признаков острого воспаления необходимость взятия мазка определяется лечащим врачом. Если необходимо получить соскоб из уретры, то перед взятием материала нужно не мочиться 1,5 — 2 часа. Если исследование назначается для контроля излеченности, то взятие материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее,чем через 14 дней.

Взятие материала на исследование возможно только врачом соответствующей квалификации.

Накануне взятия материала не применять местные антибиотики и антисептики в виде спреев, полоскания, капель, мазей. Материал берется натощак или не ранее, чем через 2 часа после еды. Чистить зубы (пастой без антибактериальных компонентов) можно.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал для исследования можно взять утром натощак или в течение дня, не ранее чем через 2 часа после еды. Чистить зубы и пить воду можно. Накануне взятия материала не применять местно антибиотики или антисептики в виде полосканий, капель или спреев. Повторное исследование для контроля излеченности целесообразно не ранее, чем через 4 недели.

Материал берется до начала терапии. Накануне не использовать антисептики, в течение двух часов исключить любые местные процедуры (промывания, капли). В случае невозможности взятия материала в медицинском офисе, Вы можете получить бесплатно расходный материал и обратиться к Вашему врачу- офтальмологу.

Уреаплазмоз — симптомы и лечение

Уреаплазмоз – это инфекционное заболевание, вызываемое микроорганизмами Ureaplasma urealyticum, которые передаются половым путём.

Данное заболевание поражает мочеполовую систему, как женщин, так и мужчин. Уреаплазмоз достаточно каверзная болезнь, которая может протекать с периодической симптоматикой, либо с её отсутствием, однако приводит к осложнениям воспалительного характера и не редко к бесплодию.

Поэтому консультация гинеколога или же консультация уролога – это первое, о чём вы должны подумать при малейших подозрениях на уреаплазмоз.

Симптомы уреаплазмоза у мужчин и женщин схожи: жжение и умеренная боль при мочеиспускании, незначительные прозрачные выделения, а также боль внизу живота.

Однако гинекологи и урологи достаточно часто сталкиваются с бессимптомным протеканием уреаплазмоза, по этой причине уреаплазмоз одно из самых распространенных заболеваний передающихся половым путем, так как многие носители, не подозревая о наличии у них уреаплазм, ведут активную половую жизнь без барьерных средств контрацепции.

Поэтому даже если вас ничего не беспокоит, желательно проходить профилактический осмотр гинеколога или уролога раз в полгода.

Своевременное лечение уреаплазмоза может избавить вас от таких неприятных явлений, как уретрит, мочекаменная болезнь, воспалительные заболевания матки и придатков, а главное от проблем во время беременности и возможного бесплодия.

Что касается бесплодия, то уреаплазмы могут вызвать его в равной степени и у женщин, и у мужчин. Уреаплазмоз передаётся и от матери к ребёнку во время беременности или родов, к тому же он может вызвать патологии в развитии плода. Поэтому подготовка к беременности обязательно должна сопровождаться сдачей анализов на уреаплазменную инфекцию и другие ЗППП.

Современные технологии диагностики гинекологических и урологических заболеваний позволяют достаточно быстро выявить уреаплазмоз. В основном применяется ПЦР (метод полимеразной цепной реакции), серологический метод, ИФА и ПИФ.

Целью диагностики является не только выявление уреаплазм, но и проверка их чувствительности к различным антибиотиком, что позволяет назначить более эффективное лечение уреаплазмоза в каждом отдельном случае.

То есть лечение уреаплазмоза должно быть строго индивидуальным, исключающим какое бы то ни было самолечение, так как. при неправильной дозировке и подборе препарата уреаплазмы приспособятся и выработают иммунитет, а это значит, что после подобного «помоги себе сам» процесс квалифицированного лечения затянется и усложнится как минимум в два раза.

Лечение уреаплазмоза

Так как микроорганизм уреаплазма по своим свойствам занимает промежуточное положение между бактериями, вирусами и паразитирующими простейшими, то и лечится уреаплазмоз антибактериальными препаратами.

Как было сказано выше, подбор антибиотиков и их дозировка осуществляются исключительно индивидуально потому, что каждый пациент – это отдельный случай, со своими особенностями, как самого организма, так и уреаплазм.

Обычно антибиотики назначаются для приёма внутрь и местного воздействия (вагинальные свечи или таблетки, инстилляции лекарственных средств в мочеиспускательный канал, массаж предстательной железы и физиотерапия).

Основной принцип в лечении уреаплазмоза, как и любого заболевания передающегося половым путём – это лечение обоих партнёров, с целью исключения возможности повторного инфицирования от больного к здоровому.

У антибиотиков есть один существенный недостаток – они не только убивают патогенные микроорганизмы, но и негативно воздействуют на здоровую микрофлору, при этом ослабляя иммунитет.

Поэтому антибактериальная терапия всегда сопровождается принятием иммуномодулирующих препаратов, которые не только поддержат иммунитет, но и дополнительно к антибиотикам помогут справиться с инфекцией.

В среднем, лечение уреаплазмоза занимает 2 недели и не вызывает особых сложностей и неудобств, кроме того, что необходимо соблюдать диету (минимум жаренного, острого и солёного), исключить алкоголь и отказаться от половой жизни на срок лечения.

После завершения курса лечения необходимо контрольное обследование.

У женщин контрольные анализы берутся перед началом ближайшей менструации и еще раз через месяц. У мужчин первый контрольный анализ проводится через 2 недели после завершения приёма антибиотиков, и также ровно через месяц.

Самые положительные эмоции как у пациента, так и у врача, вызывают отрицательные результаты проведённых анализов, которые означают, что уреаплазма побеждена. Но никто не застрахован от повторного заражения, поэтому не стоит забывать про меры профилактики уреаплазмоза:

  • Постоянный партнёр.
  • Отказ от беспорядочной половой жизни.
  • Использование барьерных средств контрацепции, если вы не уверены в партнёре.
  • Профилактический осмотр гинеколога или врача уролога раз в полгода.

Заведующая гинекологическим отделением
Карапетян Гаяне Артаваздовна

ПЦР-диагностика уреаплазмы уреалитикум (Ureaplasma parvum+urealyticum).

Выявление возудителя урогенитального уреаплазмоза (Ureaplasma parvum+urealyticum), в ходе которого определяется генетический материал (ДНК) уреаплазм.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб урогенитальный, первую порцию утренней мочи, эякулят, мазок из десневого кармана, мазок с конъюнктивы.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Женщинам рекомендуется сдавать биоматериал (урогенитальный мазок или мочу) до менструации или через 2 дня после ее окончания. Не следует мочиться в течение 2 часов до сдачи урогенитального мазка. Не подмываться до исследования.
  • Мужчинам не следует мочиться в течение 2 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи. Не подмываться до исследования.

Общая информация об исследовании

Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum являются разновидностью уреаплазм — условно-патогенных микроорганизмов, способных паразитировать на мембране сперматозоидов и эпителия слизистой оболочки мочеполовых органов. Они передаются преимущественно половым путем, возможен также вертикальный способ – от матери к ребенку во время беременности или родов.

Источник заражения – больной уреаплазменной инфекцией или бессимптомный носитель U. parvum+urealyticum .

Инкубационный период составляет 2-5 недель.

У женщин данная инфекция способна вызывать воспаление влагалища, шейки матки и ее придатков, что может приводить к внематочной беременности или бесплодию, может быть причиной выкидышей, воспаления плодных оболочек, рождения детей с низкой массой тела.

У мужчин может быть причиной воспаления уретры, мочевого пузыря, простаты, поражения яичек и их придатков, нарушения состава спермы, а также реактивных артритов и мочекаменной болезни.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы установить причину хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы.
  • Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих со сходными симптомами
  • Чтобы оценить эффективность антибактериальной терапии.
  • Для профилактического обследования.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

  • Обнаружение ДНК U. parvum+urealyticum может свидетельствовать о том, что этот микроорганизм вызвал воспалительные заболевания органов мочеполовой системы.
  • Выявление ДНК U. parvum+urealyticum при отсутствии симптомов воспалительных заболеваний мочеполовой системы расценивается как носительство.

Отрицательный результат

  • Отсутствие ДНК U. parvum+urealyticum в исследуемом биоматериале при наличии симптомов воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы свидетельствует о том, что данный возбудитель не является причиной этих заболеваний.

Что может влиять на результат?

  • Антибактериальная терапия.

Вопрос: Евгений  |  08 Июня, 2021

Как максимально ыстро делается тест пцр

Здравствуйте. При сдаче анализа до 15-00 часов срочное выполнение анализа возможно в  течение  6 часов.

Вопрос: Анна  |  07 Июня, 2021

Здравствуйте. Принимаете анализ на сахар из пальчика? (Капиллярная кровь)

Здравствуйте. При заборе крови из пальца проводим экспресс-метод определения уровня сахара. Более точные результаты дает венозный забор биоматериала.

Обнаружение Ureaplasma species методом ПЦР в режиме реального времени

Уреаплазма species — паразитирующий микроорганизм, обитающий на мембранах клеток. Занимает промежуточное место между вирусами и бактериями. Уреаплазма  не имеет клеточной стенки, ее роль выполняет трехслойная цитоплазматическая мембрана. Ураеплазма относится к условно-патогенным микроорганизмам, населяющим слизистые половых органов и мочеполового тракта. Имеет высокую тропность (избирательность) к эпителиальным клеткам мочеполовой тракт. Бессимптомное носительство наблюдается у около 70 процентов мужчин и женщин, ведущих активную половую жизнь.

«Species» — это не название конкретного вида уреаплазмы. В этот термин входят следующие виды микроорганизма:

Ureaplasma parvum

                  urealyticum

                  canigenitalium

                  cati

                  diversum

                  felinum

                  gallorale

                  loridis

Уреаплазма вызывает воспалительное заболевание – уреаплазмоз, которое сопровождается поражением мочеиспускательного канала, а так же предстательной железы у мужчин и влагалища у женщин. Клиническая картина уреаплазмоза проявляется только при увеличении количества уреаплазм выше порогового уровня (104 КОЕ), что происходит чаще всего при снижении защитных свойств организма.

Заражение уреплазмозом происходит преимущественно половым путем, включая орально-генитальный путь передачи. Новорожденным инфекция предается от инфицированной матери, во время прохождения ребенка по родовым путям.    При планировании беременности родителям необходимо обследоваться на данную инфекцию, так как во время беременности может произойти внутриутробное заражение плода, приводящим к тяжелым последствиям, особенно в период активного развития органов плода.

К факторам, способствующим заражению уреаплазмой, относятся:

— Незащищенный половой контакт и частая смена половых партнеров;

— Прием антибиотиков широкого спектра действия;

— Снижение общего и местного иммунитета.

Клинические проявления

У женщин:

— Необильные выделения из влагалище, практически бесцветные, не имеющие специфического запаха;

— Боли внизу живота по типу рези, что может быть связано с распространением воспалительного процесса на матку и придатки;

— Частые позывы к мочеиспусканию не связанные с физиологической потребностью;

— Боль и жжения во время акта мочеиспускания;

— Неприятные, умеренно болезненные ощущения при половом контакте или после полового акта.

У мужчин:

— Необильные, мутноватые выделения без запаха из наружного мочеиспускательного канала, чаще всего в утренние часы после длительной паузы между актами мочеиспускания;

— Реже встречаются умеренные болезненные ощущения при мочеиспускании, чувство жжения;

— Болезненные ощущения в области мошонки, что обусловлено проникновением инфекции в яичко и придаток яичка.

У мужчин и женщин:

— При переходе уреаплазмоза в хроническую форм, может наблюдаться бесплодие, что обусловлено развитием спаечного процесса, при этом у женщин сужается просвет маточных труб, а у мужчин «закупоривается» семявыносящий проток.

Определение уреаплазм методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) отличается высокой чувствительностью и специфичностью (98%). Принцип ПЦР заключается в идентификации уникального фрагмента ДНК, принадлежащего данному микроорганизму, после многократного удвоения исследуемого генетического материала в пробирке.

В сети КДЛ «ОЛИМП» ПЦР-исследования выполняются в режиме REAL-TIME – это означает, что после каждого аппаратного цикла (амлификации) происходит измерение количества ДНК в биоматериале. Данная процедура сводит вероятность ложноположительного результата практически к нулю!

Ureaplasma parvum, ДНК [реал-тайм ПЦР]: исследования в лаборатории KDLmed

Выявление возбудителя урогенитального уреаплазмоза (Ureaplasma parvum), в ходе которого определяется генетический материал (ДНК) уреаплазм.

Синонимы русские

Возбудитель уреаплазмоза, уреаплазма.

Синонимы английские

Ureaplasma parvum, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), первую порцию утренней мочи, эякулят, ректальный мазок.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Женщинам рекомендуется сдавать биоматериал (урогенитальный мазок или мочу) до менструации или через 2 дня после её окончания.
  • Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи.

Общая информация об исследовании

Ureaplasma parvum (в прошлом «биовар parvo») являются разновидностью уреаплазм – условно-патогенных микроорганизмов, способных паразитировать на мембране сперматозоидов и эпителия слизистой оболочки мочеполовых органов. Они передаются преимущественно половым путём, хотя возможен контактно-бытовой, а также вертикальный способ – от больной матери к ребёнку во время беременности или родов. Источник заражения – больной уреаплазменной инфекцией или бессимптомный носитель U. parvum. После инфицирования развитие инфекции происходит не во всех случаях. Ему способствуют различные иммунодефициты, нарушение факторов местной защиты, в том числе дисбиоз влагалища у женщин или хронический простатит у мужчин, сопутствующие инфекции (хламидиоз, гонорея, бактериальный вагиноз и т. д.).

Инкубационный период составляет 2-5 недель. Симптомыуреаплазменной инфекции могут быть слабо выраженными или вообще отсутствовать (характерно для женщин). У мужчин U. parvum может быть причиной воспаления уретры (негонококковый уретрит), мочевого пузыря (цистит), простаты (простатит), поражения яичек (орхит) и их придатков (эпидидимит), нарушения состава спермы (снижение подвижности и количества сперматозоидов – что грозит бесплодием), а также реактивных артритов и мочекаменной болезни. У женщин данная инфекция способна вызывать воспаление влагалища (вагинит), шейки матки (цервицит), а при ослаблении иммунитета – воспаление матки (эндометрит) и её придатков (аднексит), что может приводить к внематочной беременности или бесплодию. Кроме того, U. parvum может быть причиной выкидышей, воспаления плодных оболочек, рождения детей с низкой массой тела, а также причиной развития бронхолёгочных заболеваний (воспаления лёгких, дисплазии), бактериемии и менингита у новорождённых.

В качестве причины воспалительных заболеваний мочеполовой системы U. parvum рассматривают в том случае, если при лабораторном исследовании не выявляются другие патогенные микроорганизмы, способные вызвать эти заболевания. Единственные методы диагностики, позволяющие дифференцировать U. parvum от другого вида уреаплазм – U. urealyticum, – это молекулярно-генетические методы, в том числе и полимеразная цепная реакция. Определение вида уреаплазмы имеет значение при выборе оптимальной тактики лечения пациента.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы установить причину хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы.
  • Для дифференциальной диагностики  заболеваний, протекающих со сходными симптомами: хламидиоза, гонореи, микоплазменной инфекции (наряду с другими исследованиями).
  • Чтобы оценить эффективность антибактериальной терапии.
  • Для профилактического обследования.

Когда назначается исследование?

  • При подозрении на уреаплазменную инфекцию, в том числе после случайных половых контактов и при симптомах воспаления мочеполовой системы.
  • При планировании беременности (обоим супругам).
  • При бесплодии или невынашивании беременности.
  • При внематочной беременности.
  • При необходимости оценить эффективность антибактериальной терапии (через 1 месяц после лечения).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

  • Обнаружение ДНК U. parvum в биоматериале может свидетельствовать о том, что этот микроорганизм вызвал воспалительные заболевания органов мочеполовой системы, только при наличии симптомов воспаления и при отсутствии других патогенных микроорганизмов (хламидий, микоплазм, гонококков).
  • Выявление ДНК U. parvum при отсутствии симптомов воспалительных заболеваний мочеполовой системы расценивается как носительство.

Отрицательный результат

  • Отсутствие ДНК U. parvum в исследуемом биоматериале при наличии симптомов воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы свидетельствует о том, что данный возбудитель не является причиной этих заболеваний.

Что может влиять на результат?

  • Антибактериальная терапия.
  • Загрязнение пробы посторонними молекулами ДНК ведёт к ложноположительному результату, ингибирование полимеразной цепной реакции компонентами биопроб (гемоглобином, гепарином и т. д.) – к ложноотрицательному.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, уролог, венеролог, педиатр-неонатолог, инфекционист.

Литература

  • Kenny G.E. Genital Mycoplasmas: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, and Ureaplasma Species. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
  • Non-chlamydial non-specific genital infection. In: Oxford handbook of genitourinary medicine, HIV, and Aids / R. Pattman [et al.] (Eds) ; 1st edition. – USA : Oxford University Press, 2005 – 580 p.
  • Халдин А.А. Урогенитальный хламидиоз и уреаплазмоз: вопросы диагностики и новые возможности терапии / А. А. Халдин // Инфекции и антимикробная терапия. – 2004. — № 3. – С. 93-95.
  • Larsen B. Mycoplasma, Ureaplasma, and adverse pregnancy outcomes: a fresh look / B. Larsen, J. Hwang // Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology. Electronic journal. – Vol. 2010. – Article ID 521921.

Уреаплазма уреалитикум в у/г мазке

Уреаплазма уреалитикум в у/г мазке

Уреаплазма уреалитикум в у/г мазке — исследование для выявления возбудителя урогенитального уреаплазмоза (Ureaplasma urealyticum), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) уреаплазм в образце биоматериала, полученного из урогенитального тракта. Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие Ureaplasma urealyticum в организме и его активное размножение.   Ureaplasma urealyticum являются разновидностью уреаплазм – условно-патогенных микроорганизмов, способных паразитировать на мембране сперматозоидов и эпителия слизистой оболочки мочеполовых органов. Они передаются преимущественно половым путём, хотя возможен контактно-бытовой, а также вертикальный способ – от больной матери к ребёнку во время беременности или родов. Источник заражения – больной уреаплазменной инфекцией или бессимптомный носитель U. urealyticum. После инфицирования U. urealyticum развитие уреаплазменной инфекции происходит не во всех случаях. Ему способствуют различные иммунодефициты, нарушение факторов местной защиты, в том числе дисбиоз влагалища у женщин или хронический простатит у мужчин, сопутствующие инфекции (хламидиоз, гонорея, бактериальный вагиноз и т. д.).Чаще всего U. urealyticum является причиной воспаления уретры (негонококкового уретрита). Реже она приводит к воспалению мочевого пузыря (циститу), простаты (простатиту), поражению яичек (орхиту) и их придатков (эпидидимиту), нарушениям состава спермы (снижению подвижности и количества сперматозоидов, что грозит бесплодием), а также к реактивным артритам и мочекаменной болезни. У женщин из-за U. urealyticum может развиться воспаление влагалища (вагинит), воспаление шейки матки (цервицит), а при ослаблении иммунитета – воспаление матки (эндометрит) и её придатков (аднексит), что грозит внематочной беременностью или бесплодием. U. urealyticum может вызывать цервикальную недостаточность, выкидыши, хорионамниониты, рождение детей с пониженной массой тела (менее 2500 г), а также бронхолёгочные заболевания (воспаление лёгких, бронхолёгочную дисплазию), бактериемию и менингит у новорождённых.
В качестве причины воспалительных заболеваний мочеполовой системы U. urealyticum рассматривают в том случае, если при лабораторном исследовании не выявляются другие патогенные микроорганизмы, способные приводить к этим заболеваниям. Единственные методы диагностики, позволяющие распознать разновидность уреаплазмы U. urealyticum, – молекулярно-генетические, в том числе и полимеразная цепная реакция. Определение вида уреаплазмы имеет значение при выборе оптимальной тактики лечения пациента.

Подготовка к исследованию

Женщинам рекомендуется сдавать биоматериал (урогенитальный мазок или мочу) до менструации или через 2 дня после её окончания.
 Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи биоматериала (урогенитального мазка или мочи).

Показания к исследованию

При подозрении на уреаплазменную инфекцию, в том числе после случайных половых контактов и при симптомах воспаления мочеполовой системы.
При уретритах у мужчин.
При планировании беременности (обоим партнёрам).
При бесплодии или невынашивании беременности.
При внематочной беременности.
Чтобы оценить эффективность антибактериальной терапии (через 1 месяц после лечения).

Интерпретация

Референсные значения: отрицательно.
Положительный результат:
выявление ДНК U. urealyticum при отсутствии других патогенных микроорганизмов (хламидий, микоплазм, гонококков) свидетельствует о наличии уреаплазменной инфекции и о том, что причиной воспаления стали U. Urealyticum;
выявление ДНК U. urealyticum при отсутствии симптомов воспалительных заболеваний мочеполовой системы расценивается как носительство.
Отрицательный результат:
отсутствие ДНК U. urealyticum в исследуемом биоматериале при клинических проявлениях воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы указывает на то, что этот возбудитель не является причиной таких заболеваний.

На результаты могут влиять

Антибактериальная терапия может приводить к снижению количества возбудителя в исследуемом материале и, как следствие, к получению ложноотрицательных результатов.
Загрязнение пробы посторонними молекулами ДНК ведёт к ложноположительному результату, ингибирование полимеразной цепной реакции компонентами биопроб (гемоглобином, гепарином и т. д.) – к ложноотрицательному.

Назначается в комплексе с

Ureaplasma urealyticum, IgM
Ureaplasma urealyticum , IgG

Анализ на уреаплазмоз, Ureaplasma spp.

(Urealyticum+parvum), ДНК REAL TIME ПЦР, колич.

Диагностическое направление

Воспалительные заболевания органов малого таза

Общая характеристика

Ureaplasma spp. — это условно-патогенные микроорганизмы, обладающие способностью к уреазной активности, то есть могут разлагать мочевину до аммиака, используя фермент уреазу. Под названием Ureaplasma spp. объединены два вида уреаплазм, которые имеют разные уровни патогенности — U.urealyticum и U. parvum. U.urealyticum вызывает воспалительные заболевания мочеполовых органов, а U.parvum оказывается на поверхности слизистых оболочек урогенитального тракта клинически здоровых женщин.

Показания для назначения

1. Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.2. Планирование беременности (исследование рекомендуется проводить при хронических заболеваниях половых органов и пиелонефрите). 3. Контроль эффективности антибиотикотерапии (не ранее чем через 21 день после приёма антибактериальных препаратов).

Маркер

Маркер наличия возбудителя инфекции Ureaplasma spp. в тестируемом биоматериале.

Клиническая значимость

Уреаплазмы это условно патогенные организмы, которые часто оказываются в составе нормальной микрофлоры человека. Вместе с тем эти микроорганизмы могут быть вовлечены в воспалительный процесс при урогенитальных заболеваниях. Данные о распространении уреаплазмы среди населения разных стран противоречивые, а показатели инфицированности варьируют от 10 до 80%. Ureaplasma spp. инфицирует преимущественно органы мочеполовой системы и вызывает различные деструктивно-воспалительные процессы. У мужчин Ureaplasma spp., как правило, вызывает уретрит и простатит, а у женщин — уретрит, цервицит и воспалительные поражения тазовых органов. Особую опасность представляет урогенитальный уреаплазмоз беременных, поскольку может вызвать невынашивание, преждевременные роды, инфицирование плода и развитие послеродового сепсиса. Клинические проявления, обусловленные присутствием Ureaplasma spp., часто похожи на симптомы других заболеваний урогенитального тракта бактериальной, вирусной и других этиологий. Поэтому для успешной диагностики урогенитального микоплазмоза проводят лабораторные исследования, которые позволяют выявить и определить количество ДНК Ureaplasma spp. Уреаплазмы являются условно патогенными микроорганизмами, они могут находиться в организме человека годами, не вызывая никаких симптомов и осложнений. С помощью метода ПЦР в реальном времени возможно не только с высокой точностью выявить уреаплазмы, но также определить их количество. Причиной заболевания может быть наличие уреаплазм в клинически значимом количестве. Это помогает врачу принять правильное решение при определении необходимости лечения.


Состав показателей:

ДНК Ureaplasma spp. (urealyticum +parvum)
Метод: Полимеразная цепная реакция в реальном времени
Диапазон измерений: 10^3
Единица измерения: геномных эквивалентов/мл

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

Плазма

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Вакутейнер с разделительным гелем ЭДТА

Объем:

5.5 Миллилитров

Моча

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Моча

Условия доставки:

1 Дней. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Конусная пробирка градуированная

Секрет простаты

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Мокрота

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Эякулят

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Соскоб из уретры, цервикса, вагины

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Эппендорф с транспортной средой

Объем:

1.5 Миллилитров

Соскоб из уретры

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Эппендорф с транспортной средой

Объем:

1.5 Миллилитров

Синовиальная жидкость

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Другой тип материала

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Стерильный контейнер с крышкой

Объем:

50 Миллилитров

Правила подготовки пациента

У/г забор. Стандартные условия: в течение рабочего дня отделений МЛ «ДІЛА».Важно: — На протяжении 2-х суток перед забором материала не применять препаратов местного действия (свечи, спринцевания и др.), воздержаться от половых контактов.- На протяжении 2-х часов воздержаться от мочеиспускания.- Сдавать до лечения или не раньше, чем через 21 день после окончания курса антибактериальной, антимикотической терапии (если другое не определено лечащим врачом).Возможно: Возможны отклонения от стандартных условий по согласованию с врачом.Внимание: Условия подготовки к сдаче урогенитального материала определяются врачом. При особых указаниях врача берется в соответствии с указанной точкой забора. Другой тип БМ. Стандартные условия: в течение рабочего дня отделений МЛ «ДІЛА».Внимание: В работу может быть принят для данного метода различный тип биоматериала (это определяет только заказчик, указывая в направлении).

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерференция:

  • Не обнаружена.
  • Прием антисептиков и/или других антибактериальных, противогрибковых, местных противозачаточных препаратов искажает результаты исследования.

Интерпретация:

  • Положительный результат – в биологическом материале обнаружена ДНК Ureaplasma spp.
  • Отрицательный результат – в биологическом материале ДНК Ureaplasma spp. не обнаружена.

Ureaplasma urealyticum — обзор

МИКРОБИОЛОГИЯ

Члены семейства Mycoplasmataceae — небольшие плеоморфные бактерии, для которых характерно отсутствие клеточной стенки. Формы варьируются от нитевидных до сферических, диаметром до 0,8 мкм. Род Ureaplasma биохимически уникален тем, что все члены обладают уреазой и, следовательно, гидролизуют мочевину с образованием аденозинтрифосфата. Также производится аммиак, который увеличивает pH и ограничивает рост культуры. Ureaplasma urealyticum впервые был описан Шепардом в 1950 году; он отметил мелкие колонии, растущие среди более крупных колоний Mycoplasma в образцах, взятых из уретры и мочи мужчин с негонококковым уретритом. 1 Первоначально эти бактерии были названы «T-штаммом» Mycoplasma из-за их крошечных размеров колоний. Знание о том, что уреаза продуцируется, позволило отнести их к отдельному роду в семействе Mycoplasmataceae и легло в основу названия Ureaplasma urealyticum.

U. urealyticum , патоген человека, исторически разделен на 14 серотипов. Серотипы делятся на два разных биовара на основе биохимических и генетических особенностей. Генетические исследования показывают, что два биовара могут представлять два отдельных вида; Биовар 1 U. urealyticum (биовар parvum или предлагаемый Ureaplasma parvum ) включает серовары 1, 3, 6 и 14, а биовар 2 U. urealyticum подразделяется на три подтипа.Подтип 1 включает серовары 2, 5, 8 и 9. Подтип 2 включает серовары 4, 10, 12 и 13, а подтип 3 включает серовары 7 и 11. 2 Весь геном U. urealyticum секвенирован . 3 Это наименьший секвенированный геном прокариот, за исключением Mycoplasma genitalium , и состоит всего из 75 пар нуклеотидов ДНК. По крайней мере, 50% из 652 идентифицированных генов имеют пока еще неизвестную функцию. Описание генома должно привести к лучшему пониманию механизма заболевания, вызываемого этими неуловимыми организмами.

В культуре организмы имеют округлую или яйцевидную форму. Они различаются по размеру, но имеют диаметр около 350 нм, поэтому их нельзя увидеть в световой микроскоп. Рост может быть обнаружен в бульоне или на агаре при использовании специальной питательной среды. Четкая морфология небольших колоний (на подходящей среде) и пассажи в селективном бульоне позволяют идентифицировать культуру, хотя классификация сероваров сложнее и обычно не проводится в клинических лабораториях. В последнее время использование методов полимеразной цепной реакции (ПЦР) было рекомендовано как более практичный подход к идентификации организмов. Гены-мишени включают гены уреазы, 4 16S рТНК, 5 и многополосный антиген 6, 7 . Преимущество ПЦР-тестирования состоит в том, что не требуются определенные питательные среды и время для культивирования. Кроме того, можно легко получить информацию о биоварах и сероварах. Недостатком ПЦР-тестирования является то, что незначительное заражение может привести к ложноположительным результатам.

Практическое руководство по основам уреаплазмы

Уреаплазма — это группа бактерий, которые обычно обитают в мочевыводящих путях и репродуктивных частях человека.Это паразит, которому нужен хозяин, например животное или человек, чтобы остаться в живых.

Уреаплазма обычно является частью всех бактерий, обитающих в организме, и в основном они живут там, не вызывая никаких проблем. Иногда случается, что они размножаются в большом количестве, что нарушает хрупкое равновесие и вызывает инфекции и другие проблемы со здоровьем. Это часть Mycoplasma, которая является классом бактерий. В биологическом смысле Ureaplasma — это бактерия, принадлежащая к роду Ureaplasma из семейства Mycoplasmataceae.По своему виду микоплазмы — самые маленькие из известных человеку организмов. Они способны копировать, чтобы воспроизводить.

Одна из уникальных особенностей уреаплазмы заключается в том, что этот тип бактерий не имеет клеточной стенки. Отсутствие клеточной стенки означает, что он не реагирует на антибиотики, такие как пенициллин, в отличие от других бактерий. Однако уреаплазму можно лечить другими видами антибиотиков.

Уреаплазма живет в организме некоторых людей, даже не подозревая об этом.Он известен тем, что вызывает проблемы, связанные с репродуктивной системой как у мужчин, так и у женщин. Кроме того, уреаплазма также может поражать новорожденных, если бактерии передаются им во время родов.

Как это передается?

Путь передачи уреаплазмы — половой акт с инфицированным человеком. Согласно одному исследованию, проведенному Индийским журналом медицинской микробиологии, в 2015 году было обнаружено, что некоторые вагинальные инфекции, вызванные уреаплазмой, намного чаще встречаются у женщин, у которых было много партнеров. Кроме того, если мать заразится инфекцией во время беременности, она может быть передана ребенку во время родов или в утробе матери.

Другое исследование, опубликованное на PubMed Central, 2010, показало, что уреаплазма также выявлялась у женщин, никогда не имевших половых контактов. По этим причинам точная причина, связанная с наличием уреаплазмы, в некоторых случаях может оставаться загадкой.

Симптомы, связанные с уреаплазмой

Уреаплазма не вызывает никаких проблем, если она живет в гармонии с другими бактериальными популяциями в организме.Проблемы возникают, когда их количество начинает ненормально увеличиваться по сравнению с другими, нарушая баланс. Иммунная система человеческого организма способна предотвратить любые инфекции, возникающие в организме, будь то уреаплазма или какой-либо другой организм. Как только популяция уреаплазмы в организме начинает увеличиваться, начинаются проблемы.

Наиболее часто наблюдаемые признаки и симптомы уреаплазмы указаны ниже; если кто-то испытывает это, им следует как можно скорее обратиться к врачу. Однако стоит отметить, что уреаплазма может быть не единственным виновником этих симптомов, поскольку могут быть другие возможные причины.

Бесплодие означает, что пара в течение некоторого времени безуспешно пытается завести ребенка. Самая распространенная проблема между бесплодными мужчинами и женщинами — это наличие уреаплазмы в их организме. У мужчин уреаплазма препятствует движению спермы, а также ее количеству. У женщин уреаплазма вызывает инфекции, затрудняющие зачатие.

В одном исследовании, опубликованном в Springer Science + Business Media, 2009 г., говорится, что у женщин, страдающих бесплодием, не имеющим определенной причины, у этих женщин чаще всего встречается Ureaplasma urealyticum. Поэтому, если женщина страдает бесплодием необъяснимого характера, ей следует пройти обследование на эти бактерии.

Среди мужчин 15 процентов всех случаев бесплодия вызваны инфекциями половых путей. Однако не все эти инфекции вызваны уреаплазмой.Заболевания, передающиеся половым путем, такие как гонорея и хламидиоз, вызывают множество таких случаев бесплодия.

В одном обзоре научных исследований, опубликованном в 2015 году, говорится, что большинство случаев бесплодия у мужчин связано с U. urealyticum. Однако не было замечено, что Ureaplasma parvum вызывает бесплодие у мужчин.

  • Выделения, боль и зуд в половых органах

Инфекция, вызванная уреаплазмой, может вызывать определенные состояния, вызывающие дискомфорт и боль в половых органах и вокруг них.Сюда могут входить:

Бактериальный вагиноз — инфекция влагалища. При этом человек может чувствовать боль и жало во время мочеиспускания, зуд в половых органах и вокруг них, а также очень неприятные выделения из влагалища с неприятным запахом. Узнайте больше о бактериальном вагинозе в разделе часто задаваемых вопросов о бактериальном вагинозе.

  • Боль в области живота или таза

Уреаплазма также вызывает боль в паховой, брюшной и тазовой областях.Они состоят из:

  • Простатит : Простатит вызывает воспаление предстательной железы. Это может вызвать ощущение жжения при мочеиспускании, острую потребность в мочеиспускании, мутную мочу, кровь в моче, боль в половых органах.
  • Эндометрит : Эндометрит вызывает воспаление слизистой оболочки матки. Его симптомы — лихорадка, необычные выделения, ненормальное кровотечение из влагалища, боль в тазу. Хотя эндометрит также может быть вызван другими типами бактерий, одно исследование, опубликованное в Европейском журнале акушерства, гинекологии и репродуктивной биологии, 2003 г., связывает уреаплазму с эндометритом.
  • Камни в почках : У некоторых людей образование камней в почках было связано с инфекцией уреаплазмы. Камни в почках очень болезненны, они вызывают сильную боль в области живота, таза, поясницы и вызывают жар, затрудненное мочеиспускание, очень вонючую, кровянистую и мутную мочу.

Уретрит вызывает воспаление уретры. Именно через уретру моча выводится из организма. При уретрите человек может чувствовать жжение и покалывание во время мочеиспускания вместе с болью. Кроме того, могут появиться зуд и неприятные выделения с неприятным запахом.

Диагностика

Большинство поставщиков медицинских услуг не проводят скрининг на инфекцию уреаплазмой. Что касается симптомов, если все остальные проблемы исключены, врачи проверяют наличие инфекции с помощью мазка. Следующие тесты могут быть выполнены, если у человека проявляются признаки и симптомы уреаплазмы.

  • Мазок из шейки матки
  • Образец мочи
  • Мазок слизистой оболочки эндометрия
  • Биопсия эндометрия

Варианты лечения

Поскольку бактерии Ureaplasma не имеют клеточной стенки, они плохо реагируют на некоторые антибиотики.Однако для лечения этой инфекции используются некоторые антибиотики. Эти антибиотики назначаются с учетом того, для кого они предназначены, а также с учетом проблем со здоровьем этого человека. Это делается потому, что некоторые антибиотики могут вызвать проблемы у беременных женщин и их детей.

Инфекции половых органов и мочевыводящих путей лечат доксициклином или азитромицином. Если это не помогает, можно также использовать другие лекарства, такие как фторхинолоны или эритромицин. Новорожденным, у которых есть проблемы с легкими, может быть назначен эритромицин, а беременным женщинам с ранним разрывом плодных оболочек могут быть назначены макролидные антибиотики.

Антибиотики состоят из эритромицина, кларитромицина, эритромицина и азитромицина. Если новорожденного лечат с помощью антибиотиков, риск развития инфекции, связанной с уреаплазмой, может быть значительно снижен.

Профилактика инфекции уреаплазмы

Воздержание от секса — единственный надежный способ предотвратить заражение уреаплазмой. Наряду с этим, использование защиты в виде презервативов также может предотвратить инфекцию уреаплазмы наряду с заболеваниями, передающимися половым путем.В связи с этим некоторые люди считают, что контроль над рождаемостью предотвращает заболевания, передающиеся половым путем. Они не. Чтобы предотвратить эти инфекции, эффективны только презервативы и зубные прокладки.

Уреаплазма, влияющая на фертильность

Уреаплазма связана с преждевременными родами. Однако это не единственный фактор, который его вызывает. Наиболее частой причиной преждевременных родов является инфекция тканей репродуктивных органов. К ним относятся инфекции, вызванные бактериями амниотического мешка, влагалища и шейки матки.Врачи проводят исследования, чтобы найти связь между воспалением и инфекцией уреаплазмы.

Существуют различные типы уреаплазмы, которые связаны со следующими осложнениями, в том числе:

  • Ранний разрыв плодной оболочки
  • Преждевременные роды
  • внутриамниотическая инфекция
  • Хориоамнионит
  • Фуниситис
  • Малый вес ребенка при рождении
  • Плацентарная инвазия

Инфекция уреаплазмы также связана с повышенным риском развития послеродового эндометрита, который вызывает воспаление матки.Пока врачи не смогли найти однозначной связи с этим.

Уреаплазма матери и ребенка во время беременности

Уреаплазма поражает недоношенных детей. У новорожденных детей могут развиться следующие симптомы:

  • Пневмония
  • Травма головного мозга и менингит
  • Проблемы с дыханием и травмы легких

Инфекция уреаплазма также может передаваться от инфицированной матери к плоду в утробе матери.В этом случае может произойти следующее:

  • Преждевременный разрыв плодных оболочек
  • Риск выкидыша
  • Риск преждевременных родов
  • Риск мертворождения

Чтобы снизить шансы этих беременных женщин, необходимо пройти обследование и лечение от инфекции уреаплазмы.

Последние мысли

Уреаплазма естественным образом встречается в организме человека, и это не вызывает никаких проблем, если только что-то не заставляет их размножаться быстрее, и в этом случае баланс бактериальной популяции в организме нарушается.Единственная ситуация, о которой вам нужно беспокоиться, — это когда она присутствует в организме во время беременности.

Доктора еще не решили, должны ли беременные женщины проходить обследование и лечение от такого рода инфекции или нет. Если кто-то обеспокоен развитием какого-либо осложнения, связанного с беременностью, он должен как можно скорее поговорить со своим врачом. Врач поможет им определиться с доступными вариантами.

Список литературы

  • Симптомы и диагностика: Healthline.com & WebMD
  • Национальная медицинская библиотека — Национальные институты здравоохранения

Ureaplasma Urealyticum и Parvum Test Online

Что такое Ureaplasma Urealyticum / Parvum?

Уреаплазма — это бактерия, которая может передаваться половым путем, хотя это не так. считается классической ИППП или ЗППП из-за низкой степени патогенности. Два виды — Parvum и Urealyticum.

По оценкам, довольно большая часть сексуально активного населения инфицированы уреаплазмой, не вызывая при этом никаких проблем.Однако мы оспариваем претензии, зарегистрированные на некоторых веб-сайтах, что более 70% населения Великобритании имеют это инфекционное заболевание. Обработав тысячи образцов мочи и мазков на протяжении многих лет, Распространенность этой инфекции, по-видимому, не так широко распространена, как предполагает это утверждение.

Симптомы уреаплазмы

У большинства людей отсутствуют какие-либо симптомы, и нет никаких доказательств того, что Уреаплазма имеет долгосрочные последствия для здоровья бессимптомных людей.При наличии симптомов к ним относятся:

  • Чувство жжения при мочеиспускании
  • Раздражение уретры
  • Необычные выделения из влагалища у женщин
  • Выделения из уретры у мужчин

Иногда мы сталкиваемся с пациентами женского пола, у которых были хронические цистит / инфекции мочевыводящих путей, при посеве каких-либо признаков бактериальные организмы.Когда мы проверяем мочу на уреаплазму с помощью ПЦР, мы затем найти его присутствующим; поэтому мы считаем, что уреаплазма может быть причастна к такие случаи.

Стоит ли беспокоиться по поводу уреаплазмы?

Как правило, мы советуем не беспокоиться об уреаплазме, хотя если инфекция вызывает внешние симптомы, мы рекомендуем курс антибиотики. Если у одного из партнеров есть симптомы, мы рекомендуем лечение другой партнер, поскольку бактерии могут передаваться половым путем.

Вопрос о том, может ли уреаплазма вызывать долгосрочные проблемы, все еще не решен, но нет реальных доказательств, подтверждающих некоторые из пугающих историй на Интернет. Мы рекомендуем вам не читать сайты, на которых нет медицинских поддержки, поскольку есть информация, которая не подтверждена эмпирическими данными.

Могу ли я пройти тестирование на уреаплазму?

Проверить на уреаплазму можно с помощью образца мочи или вагинального мазка.В образец мочи или мазок подвергают тесту ПЦР, который ищет ДНК бактерии. Пока бактерии присутствуют в образце мочи или тампоне. (что они будут, если вы инфицированы и возьмете образец в соответствии с указаниями), затем этот тест даст положительный результат. Результаты теста на уреаплазму в норме обработка займет 36 часов. Если у вас есть симптомы, мы рекомендуем более широкий экран. например, наш Полный экран ИППП, который проверяет 7 инфекций, которые могут вызывать такие же симптомы как уреаплазма.

Легко ли лечить уреаплазму?

К счастью, в большинстве случаев уреаплазма легко поддается лечению. Если вы хотите пройти повторное тестирование, тогда мы рекомендуем подождать через 3-4 недели после завершения лечения — там есть риск получения ложноположительного результата, если вы проведете тестирование раньше. Некоторые люди продолжают испытывать симптомы исчезнут после того, как инфекция исчезнет, ​​но со временем эти симптомы исчезнут.

Инфекция уреаплазмой: история вопроса, патофизиология, эпидемиология

  • Сяо Л., Параланов В., Гласс Дж. И., Даффи Л. Б., Робертсон Дж. А., Касселл Г. Х. и др. Обширный горизонтальный перенос генов в уреаплазмах от человека ставит под сомнение полезность серотипирования в диагностических целях. Дж. Клин Микробиол . 2011 Август 49 (8): 2818-26. [Медлайн]. [Полный текст].

  • Дегучи Т., Маэда С., Тамаки М., Йошида Т., Исико Х., Ито М.Анализ генов gyrA и parC Mycoplasma genitalium, обнаруженных в моче первого прохождения у мужчин с негонококковым уретритом до и после лечения фторхинолоном. J Antimicrob Chemother . 2001 ноябрь 48 (5): 742-4. [Медлайн].

  • Сяо Л., Параланов В., Гласс Дж. И. , Даффи Л. Б., Робертсон Дж. А., Касселл Г. Х. Обширный горизонтальный перенос генов в уреаплазмах от человека ставит под сомнение полезность серотипирования в диагностических целях. Дж. Клин Микробиол .2011 Август 49 (8): 2818-26. [Медлайн].

  • Waites KB, Talkington DF. Новые разработки в области заболеваний человека, вызываемых микоплазмами. Blanchard A, Browning G, ред. Микоплазмы: патогенез, молекулярная биология и новые стратегии борьбы . Норидж, Соединенное Королевство: Horizon Bioscience; 2005. Глава 9, страницы 289–354.

  • Вебстер Д., Виндзор Н., Линг С., Виндзор Д., Питчер Д. Хронический бронхит у пациентов с ослабленным иммунитетом: связь с новыми видами микоплазм. евро J Clin Microbiol Infect Dis . 2003 Сентябрь 22 (9): 530-4. [Медлайн].

  • Ling CL, Oravcova K, Beattie TF, Creer DD, Dilworth P, Fulton NL, et al. Инструменты для обнаружения Mycoplasma amphoriforme: основного респираторного патогена ?. Дж. Клин Микробиол . 2014 Апрель, 52 (4): 1177-81. [Медлайн].

  • Дженсен Дж. С.. Mycoplasma genitalium: этиологический агент уретрита и других заболеваний, передающихся половым путем. J Eur Acad Dermatol Venereol .2004 18 января (1): 1-11. [Медлайн].

  • Doble A, Thomas BJ, Furr PM, Walker MM, Harris JR, Witherow RO, et al. Поиск инфекционных агентов при хроническом абактериальном простатите с помощью биопсии под ультразвуковым контролем. Br J Урол . 1989 Сентябрь 64 (3): 297-301. [Медлайн].

  • Кригер JN, Райли DE, Робертс MC, Berger RE. Последовательности прокариотической ДНК у пациентов с хроническим идиопатическим простатитом. Дж. Клин Микробиол . 1996 Декабрь 34 (12): 3120-8.[Медлайн].

  • Сони С., Александр С., Верландер Н., Сондерс П., Ричардсон Д., Фишер М. и др. Распространенность уретральной и ректальной Mycoplasma genitalium и ее ассоциаций у мужчин, практикующих секс с мужчинами, посещающих клинику мочеполовой медицины. Заражение, передающееся половым путем . 2010 Февраль 86 (1): 21-4. [Медлайн].

  • Ласк М.Дж., Конечны П., Наинг З.В., Гарден Флорида, Камминг Р.Г., Роулинсон В.Д. Mycoplasma genitalium связана с цервицитом и ВИЧ-инфекцией в городских австралийских клиниках по лечению ИППП. Заражение, передающееся половым путем . 2011 Март 87 (2): 107-9. [Медлайн].

  • Lowe J, Watkins WJ, Edwards MO, Spiller OB, Jacqz-Aigrain E, Kotecha SJ, et al. Связь между колонизацией легочной уреаплазмой и бронхолегочной дисплазией у недоношенных детей: обновленный систематический обзор и метаанализ. Pediatr Infect Dis J . 2014 Июль 33 (7): 697-702. [Медлайн].

  • Novy MJ, Duffy L, Axthelm MK, Sadowsky DW, Witkin SS, Gravett MG и др.Ureaplasma parvum или Mycoplasma hominis как единственные патогены вызывают хориоамнионит, преждевременные роды и пневмонию плода у макак-резусов. Репродукция науки . 2009 16 января (1): 56-70. [Медлайн].

  • Lis R, Rowhani-Rahbar A, Manhart LE. Инфекция Mycoplasma genitalium и заболевания женских половых путей: метаанализ. Clin Infect Dis . 2015 г. 1. 61 (3): 418-26. [Медлайн].

  • Ферр П.М., Тейлор-Робинсон Д., Вебстер А.Д.Микоплазмы и уреаплазмы у пациентов с гипогаммаглобулинемией и их роль в развитии артрита: микробиологические наблюдения более двадцати лет. Энн Рум Дис . 1994 г., 53 (3): 183-7. [Медлайн].

  • Бергин С.М., Мендис С.М., Янг Б., Бинти Ижаруддин Э.Послеоперационный абсцесс мозга Mycoplasma hominis: помните !. BMJ Case Rep . 2017 г. 9 января 2017 г .: [Medline].

  • Geissdörfer W, Sandner G, John S, Gessner A, Schoerner C, Schröppel K. Менингит Ureaplasma urealyticum у взрослого пациента. Дж. Клин Микробиол . 2008 Март 46 (3): 1141-3. [Медлайн].

  • Bharat A, Cunningham SA, Scott Budinger GR, Kreisel D, DeWet CJ, Gelman AE, et al. Распространенная инфекция уреаплазмы как причина фатальной гипераммониемии у людей. Научный перевод медицины . 2015 22 апреля. 7 (284): 284re3. [Медлайн].

  • Wylam ME, Kennedy CC, Hernandez NM, Peters SG, Maleszewski JJ, Cassivi SD, et al. Смертельная гипераммонемия, вызванная Mycoplasma hominis. Ланцет . 2013, 7 декабря. 382 (9908): 1956. [Медлайн].

  • Уэйтс К. Б., Сяо Л., Даффи Л. Б. Микоплазма и уреаплазма. Лабер А.Л., изд. Справочник по клинической микробиологии . 4-е изд. АСМ Пресс; 2016.

  • Fernández J, Karau MJ, Cunningham SA, Greenwood-Quaintance KE, Patel R.Антимикробная чувствительность и клональность клинических изолятов уреаплазмы в США. Противомикробные агенты Chemother . 2016 августа 60 (8): 4793-8. [Медлайн].

  • Beeton ML, Chalker VJ, Maxwell NC, Kotecha S, Spiller OB. Параллельное титрование и определение устойчивости к антибиотикам у видов уреаплазмы с выявлением новых точечных мутаций в генах, связанных с устойчивостью. Противомикробные агенты Chemother . 2009 Май. 53 (5): 2020-7.[Медлайн]. [Полный текст].

  • Сяо Л., Крабб Д.М., Даффи Л.Б., Параланов В., Гласс Д.И., Гамилос Д.Л. Мутации в рибосомных белках и рибосомной РНК придают устойчивость к макролидам у Ureaplasma spp. Int J Антимикробные агенты . 2011 Апрель 37 (4): 377-9. [Медлайн].

  • Bebear CM, Renaudin H, Charron A, Gruson D, Lefrancois M, Bebear C. Активность тровафлоксацина in vitro по сравнению с активностью пяти противомикробных препаратов против микоплазм, включая Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, была охарактеризована генетически устойчивыми изолятами к фторхинолонам. Противомикробные агенты Chemother . 2000 Сентябрь 44 (9): 2557-60. [Медлайн].

  • Даффи Л., Гласс Дж., Холл Г., Эйвери Р., Ракли Р., Петерсон С. и др. Устойчивость к фторхинолонам у Ureaplasma parvum в США. Дж. Клин Микробиол . 2006 апр. 44 (4): 1590-1. [Медлайн].

  • Waites KB, Sims PJ, Crouse DT, Geerts MH, Shoup RE, Hamrick WB и др. Концентрации эритромицина в сыворотке крови после внутривенной инфузии у недоношенных новорожденных, получавших лечение от инфекции Ureaplasma urealyticum. Pediatr Infect Dis J . 1994 г., 13 (4): 287-93. [Медлайн].

  • Merchan LM, Hassan HE, Terrin ML, Waites KB, Kaufman DA, Ambalavanan N, et al. Фармакокинетика, микробный ответ и легочные исходы многократного внутривенного введения азитромицина у недоношенных детей с риском респираторной колонизации уреаплазмой. Противомикробные агенты Chemother . 2015 Январь 59 (1): 570-8. [Медлайн].

  • Уэйтс КБ, Краус Д.Т., Касселл Г.Х.Терапевтические аспекты инфекций Ureaplasma urealyticum у новорожденных. Clin Infect Dis . 1993, 17 августа, приложение 1: S208-14. [Медлайн].

  • Jensen JS, Bradshaw CS, Tabrizi SN, Fairley CK, Hamasuna R. Неэффективность лечения азитромицином у Mycoplasma genitalium-положительных пациентов с негонококковым уретритом связана с индуцированной резистентностью к макролидам. Clin Infect Dis . 2008 15 декабря. 47 (12): 1546-53. [Медлайн].

  • Bradshaw CS, Jensen JS, Tabrizi SN, Read TR, Garland SM, Hopkins CA, et al.Недостаточность азитромицина при уретрите Mycoplasma genitalium. Emerg Infect Dis . 2006 июл.12 (7): 1149-52. [Медлайн].

  • Glaser AM, Geisler WM, Ratliff AE, Xiao L, Waites KB, Gaisa M. Два случая мочеполовой инфекции Mycoplasma genitalium с множественной лекарственной устойчивостью, успешно ликвидированных миноциклином. Int J STD AIDS . 2019 30 апреля (5): 512-514. [Медлайн].

  • Schelonka RL, Katz B, Waites KB, Benjamin DK Jr. Критическая оценка роли уреаплазмы в развитии бронхолегочной дисплазии с помощью метааналитических методов. Pediatr Infect Dis J . 2005 24 декабря (12): 1033-9. [Медлайн].

  • Хуанг Ц., Чжу Х.Л., Сюй К.Р., Ван С.Ю., Фан ЛК, Чжу ВБ. Инфекция микоплазмы и уреаплазмы и мужское бесплодие: систематический обзор и метаанализ. Андрология . 2015 Сентябрь 3 (5): 809-16. [Медлайн].

  • Битон М.Л., Чалкер В.Дж., Джонс Л.К., Максвелл Северная Каролина, Спиллер ОБ. Устойчивость к антибиотикам среди клинических изолятов уреаплазмы, выявленных у новорожденных в Англии и Уэльсе в период с 2007 по 2013 год. Противомикробные агенты Chemother . 2015, 12 октября. [Medline].

  • Сравнительный анализ генома 19 штаммов Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum | BMC Microbiology

  • 1.

    Shepard MC: Выделение организмов, подобных плевропневмонии, у мужчин-негров с негонококковым уретритом и без него. Am J Syph Gonor Vener Dis. 1954, 38: 113-124.

    CAS Google Scholar

  • 2.

    Shepard MC, Lunceford CD, Ford DK, Purcell RH, Taylor-Robinson D, Razin S, Black FT: Ureaplasma urealyticumgen.ноя sp. nov .: предложенная номенклатура микоплазм человека Т 7 (штамм Т). Int J Syst Bacteriol. 1974, 24: 160-171.

    Артикул Google Scholar

  • 3.

    Робертсон Дж. А., Стемке Г. В.: Расширенная схема серотипирования штаммов Ureaplasma urealyticum, выделенных от людей. J Clin Microbiol. 1982, 15 (5): 873-878.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 4.

    Харасава Р., Канамото Ю.: Дифференциация двух биоваров Ureaplasma urealyticum на основе межгенной спейсерной области 16S-23S рРНК. J Clin Microbiol. 1999, 37 (12): 4135-4138.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 5.

    Конг Ф., Джеймс Дж., Ма З., Гордон С., Бин В., Гилберт Г.Л.: Филогенетический анализ Ureaplasma urealyticum — поддержка создания нового вида, Ureaplasma parvum. Int J Syst Bacteriol.1999, 49 (Pt 4): 1879-1889.

    PubMed CAS Google Scholar

  • 6.

    Конг Ф., Ма З., Джеймс Дж., Гордон С., Гилберт Г.Л.: Идентификация видов и определение подтипов Ureaplasma parvum и Ureaplasma urealyticum с использованием анализов на основе ПЦР. J Clin Microbiol. 2000, 38 (3): 1175-1179.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 7.

    Робертсон Дж. А., Стемке Г. В., Дэвис Дж. В., Харасава Р., Тиркелл Д., Конг Ф., Шепард М. С., Форд Д. К.: Предложение Ureaplasma parvum sp.ноя и исправленное описание Ureaplasma urealyticum (Shepard et al. 1974). Int J Syst Evol Microbiol. 2002, 52: 587-597.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 8.

    Робертсон Дж. А., Векрис А., Бебир С., Стемке Г. В.: Полимеразная цепная реакция с использованием последовательностей гена 16S рРНК отличает два биовара Ureaplasma urealyticum. J Clin Microbiol. 1993, 31 (4): 824-830.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 9.

    Робертсон Дж. А., Ховард Л. А., Зиннер С. Л., Стемке Г. В.: Сравнение генов 16S рРНК в биоварах T960 и parvo уреаплазм, выделенных от человека. Int J Syst Bacteriol. 1994, 44 (4): 836-838.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 10.

    Waites KB, Katz B, Schelonka RL: Микоплазмы и уреаплазмы как патогены новорожденных. Clin Microbiol Rev.2005, 18 (4): 757-789.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 11.

    Kong F, Ma Z, James G, Gordon S, Gilbert GL: Молекулярное генотипирование видов уреаплазмы человека на основе последовательностей генов многополосного антигена (MBA). Int J Syst Evol Microbiol. 2000, 50 (Pt 5): 1921-1929.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 12.

    Сяо Л., Гласс Дж. И., Параланов В., Юзеф С., Касселл Г. Х., Даффи Л. Б., Уэйтс К. Б.: Обнаружение и характеристика видов уреаплазмы человека и сероваров с помощью ПЦР в реальном времени.J Clin Microbiol. 2010, 48 (8): 2715-2723.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 13.

    Уэйтс К. Б., Токингтон Д. Ф.: Mycoplasma pneumoniae и ее роль в качестве патогена для человека. Clin Microbiol Rev.2004, 17 (4): 697-728. содержание

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 14.

    Teng K, Li M, Yu W, Li H, Shen D, Liu D: Сравнение ПЦР с культурой для обнаружения Ureaplasma urealyticum в клинических образцах от пациентов с урогенитальными инфекциями.J Clin Microbiol. 1994, 32 (9): 2232-2234.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 15.

    Zheng X, Teng LJ, Watson HL, Glass JI, Blanchard A, Cassell GH: Небольшие повторяющиеся единицы в гене антигена MB Ureaplasma urealyticum кодируют специфичность серовара и связаны с изменением размера антигена. Infect Immun. 1995, 63 (3): 891-898.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 16.

    Kilian M, Brown MB, Brown TA, Freundt EA, Cassell GH: активность протеазы иммуноглобулина A1 в штаммах Ureaplasma urealyticum. Acta Pathol Microbiol Immunol Scand B. 1984, 92 (1): 61-64.

    PubMed CAS Google Scholar

  • 17.

    Килиан М., Фройндт Е.А.: Исключительное появление внеклеточной протеазы, способной расщеплять шарнирную область человеческого иммуноглобулина A1 в штаммах Ureaplasma urealyticum. Isr J Med Sci.1984, 20 (10): 938-941.

    PubMed CAS Google Scholar

  • 18.

    Jose J, Otto GW, Meyer TF: Сайт интеграции гена iga в комменсальных Neisseria sp. Mol Genet Genomics. 2003, 269 (2): 197-204.

    PubMed CAS Google Scholar

  • 19.

    Facius D, Meyer TF: Новый детерминант (comA), необходимый для способности к естественной трансформации Neisseria gonorrhoeae и влияние дефекта comA на вариацию пилина.Mol Microbiol. 1993, 10 (4): 699-712.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 20.

    Де Силва Н.С., Куинн П.А.: Локализация эндогенной активности фосфолипаз А и С в Ureaplasma urealyticum. J Clin Microbiol. 1991, 29 (7): 1498-1503.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 21.

    Де Силва Н.С., Куинн П.А.: Эндогенная активность фосфолипаз А и С в Ureaplasma urealyticum.J Clin Microbiol. 1986, 23 (2): 354-359.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 22.

    Де Силва Н.С., Куинн П.А.: Быстрый скрининговый анализ активности фосфолипазы С в микоплазмах. J Clin Microbiol. 1987, 25 (4): 729-731.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 23.

    DeSilva NS, Quinn PA: Характеристика активности фосфолипазы A1, A2, C в мембранах Ureaplasma urealyticum.Mol Cell Biochem. 1999, 201 (1-2): 159-167.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 24.

    Xiao L, Glass JI, Paralanov V, Duffy L, Cassell GH, Waites KB: Широкий горизонтальный перенос генов при уреаплазме человека ставит под сомнение полезность серотипирования в диагностических целях [аннотация]. 18-й Конгресс Международной организации микоплазмологии. 2010, Италия: Кьянчано Терме

    Google Scholar

  • 25.

    Glass JI, Lefkowitz EJ, Glass JS, Heiner CR, Chen EY, Cassell GH: Полная последовательность патогена слизистой оболочки Ureaplasma urealyticum. Природа. 2000, 407 (6805): 757-762.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 26.

    Сяо Л., Параланов В., Гласс Дж. И., Даффи Л. Б., Робертсон Дж. А., Касселл Г. Х., Чен Ю., Уэйтс К. Б.: Обширный горизонтальный перенос генов в уреаплазмах от человека ставит под сомнение полезность серотипирования в диагностических целях.J Clin Microbiol. 2011, 49 (8): 2818-2826.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 27.

    Harasawa R, Cassell GH: Филогенетический анализ генов, кодирующих 16S рРНК в уреаплазмах млекопитающих. Int J Syst Bacteriol. 1996, 46 (3): 827-829.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 28.

    Манилов Дж .: Филогения и эволюция.Молекулярная биология и патогенность микоплазм. Отредактировано: Разин С., Херрманн Р. 2002, Нью-Йорк: Kluwer, 41-

    Google Scholar

  • 29.

    Knox CL, Giffard P, Timms P: Филогения Ureaplasma urealyticum на основе фрагмента гена mba. Int J Syst Bacteriol. 1998, 48 (Pt 4): 1323-1331.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 30.

    Ван Х., Маллани П. Большая резольваза TndX необходима и достаточна для интеграции и удаления производных нового конъюгативного транспозона Tn5397.J Bacteriol. 2000, 182 (23): 6577-6583.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 31.

    Догерти Б.А., Хилл С., Вайдман Дж. Ф., Ричардсон Д. Р., Вентер Дж. С., Росс Р. П.: Последовательность и анализ конъюгированной плазмиды pMRC01, продуцирующей бактериоцин, размером 60 т.п.н. из Lactococcus lactis DPC3147. Mol Microbiol. 1998, 29 (4): 1029-1038.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 32.

    Schroder G, Krause S, Zechner EL, Traxler B, Yeo HJ, Lurz R, Waksman G, Lanka E: TraG-подобные белки систем переноса ДНК и системы секреции Helicobacter pylori типа IV: ворота внутренней мембраны для экспортируемых субстратов? . J Bacteriol. 2002, 184 (10): 2767-2779.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 33.

    Byrd DR, Matson SW: Никинг путем переэтерификации: реакция, катализируемая релаксазой.Mol Microbiol. 1997, 25 (6): 1011-1022.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 34.

    Момыналиев К., Клубин А., Челышева В., Селезнева О., Акопян Т., Говорун В. Сравнительный анализ генома клинических изолятов Ureaplasma parvum. Res Microbiol. 2007, 158 (4): 371-378.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 35.

    Dybvig K, Sitaraman R, French CT: Семейство ферментов рестрикции с переменной фазой с разными специфичностями, генерируемыми высокочастотными перестройками генов.Proc Natl Acad Sci U S. A. 1998, 95 (23): 13923-13928.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 36.

    Sitaraman R, Dybvig K: локусы hsd Mycoplasma pulmonis: организация, перестройки и экспрессия генов. Mol Microbiol. 1997, 26 (1): 109-120.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 37.

    Dybvig K, Yu H: Регулирование системы рестрикции и модификации посредством инверсии ДНК в Mycoplasma pulmonis.Mol Microbiol. 1994, 12 (4): 547-560.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 38.

    Рид Т.Д., Брунхэм Р.К., Шен С., Гилл С.Р., Гейдельберг Дж. Ф., Уайт О., Хики Е. К., Петерсон Дж., Аттербек Т., Берри К. и др.: Последовательности генома Chlamydia trachomatis MoPn и Chlamydia pneumoniae AR39. Nucleic Acids Res. 2000, 28 (6): 1397-1406.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 39.

    Катер Л.А., Гетцл Э.Дж., Остин К.Ф.: Выделение фосфолипазы эозинофилов человека Д. Дж. Клин Инвест. 1976, 57 (5): 1173-1180.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 40.

    Marques LM, Ueno PM, Buzinhani M, Cortez BA, Neto RL, Yamaguti M, Oliveira RC, Guimaraes AM, Monezi TA, Braga AC, Marques LM, Ueno PM, Buzinhani M, Cortez BA, Neto RL , Ямагути М., Оливейра Р.К., Гимараеш А.М., Монези Т.А., Брага А.С. и др.: Инвазия Ureaplasma diversum в клетки Hep-2.BMC Microbiol. 2010, 10: 83-

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 41.

    Fliegera A, Gong S, Faigle M, Neumeister B: Критическая оценка п-нитрофенилфосфорилхолина (p-NPPC) в качестве искусственного субстрата для обнаружения фосфолипазы C *. Enzyme Microb Technol. 2000, 26 (5): 451-458.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 42.

    Park DW, Bae YS, Nam JO, Kim JH, Lee YG, Park YK, Ryu SH, Baek SH: Регулирование экспрессии циклооксигеназы-2 фосфолипазой D в человеческих клетках WISH, полученных из амниона. Mol Pharmacol. 2002, 61 (3): 614-619.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 43.

    Lin L, Ayala P, Larson J, Mulks M, Fukuda M, Carlsson SR, Enns C, So M: протеаза Neisseria типа 2 IgA1 расщепляет LAMP1 и способствует выживанию бактерий в эпителиальных клетках.Mol Microbiol. 1997, 24 (3): 1083-1094.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 44.

    Somarajan SR, Kannan TR, Baseman JB: Mycoplasma pneumoniae Mpn133 представляет собой цитотоксическую нуклеазу с областью, богатой глутаминовой кислотой, лизином и серином, необходимой для связывания и интернализации, но не для ферментативной активности. Cell Microbiol. 2010, 12 (12): 1821-1831.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 45.

    Abdullah KM, Udoh EA, Shewen PE, Mellors A: Нейтральная гликопротеиназа Pasteurella haemolytica A1 специфически расщепляет O-сиалогликопротеины. Infect Immun. 1992, 60 (1): 56-62.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 46.

    Mehta PK, Pandey AK, Subbian S, El-Etr SH, Cirillo SL, Samrakandi MM, Cirillo JD: Идентификация мутантов инфекции макрофагами Mycobacterium marinum. Microb Pathog. 2006, 40 (4): 139-151.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 47.

    Falagas ME, Betsi GI, Athanasiou S: Пробиотики для лечения женщин с бактериальным вагинозом. Clin Microbiol Infect. 2007, 13 (7): 657-664.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 48.

    Цанг П., Мерритт Дж., Нгуен Т., Ши В., Ци Ф .: Идентификация генов, связанных с производством мутацина I в Streptococcus mutans, с использованием случайного инсерционного мутагенеза.Микробиология. 2005, 151 (Pt 12): 3947-3955.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 49.

    Бен-Менахем Г., Химмельрейх Р., Херрманн Р., Ахаровиц Ю., Роттем С. Тиоредоксинредуктазная система микоплазм. Микробиология. 1997, 143 (Pt 6): 1933-1940.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 50.

    Чжэн X, Уотсон Х.Л., Уэйтс К.Б., Касселл Г.Х.: Разнообразие серотипов и вариация антигенов среди инвазивных изолятов Ureaplasma urealyticum от новорожденных.Infect Immun. 1992, 60 (8): 3472-3474.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 51.

    Zheng X, Lau K, Frazier M, Cassell GH, Watson HL: Картирование эпитопа вариабельной повторяющейся области с антигеном MB Ureaplasma urealyticum. Clin Diagn Lab Immunol. 1996, 3 (6): 774-778.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 52.

    Шимицу Т., Кида Ю., Кувано К. Липопротеины Ureaplasma parvum, включая антиген MB, активируют NF- {каппа} B через TLR1, TLR2 и TLR6. Микробиология. 2008, 154 (Pt 5): 1318-1325.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 53.

    Monecke S, Helbig JH, Jacobs E: Фазовые вариации многополосного белка в Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum. Int J Med Microbiol. 2003, 293 (2-3): 203-211.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 54.

    Zimmerman CU, Rosengarten R, Spergser J: Антигенная вариация уреаплазмы за пределами вариации фазы MBA: инверсии ДНК, генерирующие химерные структуры и переключение экспрессии N-концевого паралога MBA UU172. Mol Microbiol. 2011, 79 (3): 663-676.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 55.

    Zimmerman CU, Stiedl T, Rosengarten R, Spergser J: Альтернативные фазовые вариации в экспрессии двух основных поверхностных мембранных белков (MBA и UU376) серовара 3 Ureaplasma parvum.FEMS Microbiol Lett. 2009, 292 (2): 187-193.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 56.

    Рон Й., Флитман-Тене Р., Дибвиг К., Йогев Д. Идентификация и характеристика сайт-специфической рекомбиназы тирозина в вариабельных локусах Mycoplasma bovis, Mycoplasma pulmonis и Mycoplasma agalactiae. Ген. 2002, 292 (1-2): 205-211.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 57.

    Ситараман Р., Денисон А.М., Дибвиг К.: Уникальная бифункциональная сайт-специфическая ДНК-рекомбиназа из Mycoplasma pulmonis. Mol Microbiol. 2002, 46 (4): 1033-1040.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 58.

    Czurda S, Jechlinger W., Rosengarten R, Chopra-Dewasthaly R: Xer1-опосредованные сайт-специфические инверсии и вырезания ДНК в Mycoplasma agalactiae. J Bacteriol. 2010, 192 (17): 4462-4473.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 59.

    Робертсон Дж. А., Стемке Г. В.: Модифицированный тест метаболического ингибирования для серотипирующих штаммов Ureaplasma urealyticum (Т-штамм Mycoplasma). J Clin Microbiol. 1979, 9 (6): 673-676.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 60.

    Смит Д.Г., Рассел В.К., Тиркелл Д.: Адгезия Ureaplasma urealyticum к эпителиальным клеткам человека. Микробиология. 1994, 140 (Pt 10): 2893-2898.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 61.

    Уэйтс К.Б., Щелонка Р.Л., Сяо Л., Григсби П.Л., Новый М.Дж.: Врожденные и условно-патогенные инфекции: виды уреаплазм и Mycoplasma hominis. Semin Fetal Neonatal Med. 2009, 14 (3): 190-199.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 62.

    Робертсон Дж. А., Стемлер М. Е., Стемке Г. В.: Иммуноглобулин А протеазная активность Ureaplasma urealyticum. J Clin Microbiol. 1984, 19 (2): 255-258.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 63.

    Дегучи Т., Йошида Т., Миядзава Т., Ясуда М., Тамаки М., Ишико Х., Маеда С.: Ассоциация Ureaplasma urealyticum (биовар 2) с негонококковым уретритом. Sex Transm Dis. 2004, 31 (3): 192-195.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 64.

    Повлсен К., Бьорнелиус Э, Лидбринк П., Линд I. Связь биовара 2 Ureaplasma urealyticum с негонококковым уретритом. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2002, 21 (2): 97-101.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 65.

    Маэда С., Дегучи Т., Ишико Х., Мацумото Т., Наито С., Кумон Х., Цукамото Т., Онодера С., Камидоно С. Обнаружение Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum (биовар 1) и уреалиплазмы (биовар 1) и уреалиплазма пациенты с негонококковым уретритом с использованием гибридизации полимеразной цепной реакции с микротитровальным планшетом. Int J Urol. 2004, 11 (4): 750-754.

    PubMed Статья Google Scholar

  • 66.

    Ондондо Р.О., Уиттингтон В.Л., Астете С.Г., Тоттен П.А.: Дифференциальная ассоциация видов уреаплазмы с негонококковым уретритом у гетеросексуальных мужчин.Половая трансмиссия. 2010, 86 (4): 271-275.

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 67.

    Abele-Horn M, Wolff C, Dressel P, Pfaff F, Zimmermann A: Ассоциация биоваров Ureaplasma urealyticum с клиническим исходом для новорожденных, акушерских пациентов и гинекологических пациентов с воспалительными заболеваниями органов малого таза. J Clin Microbiol. 1997, 35 (5): 1199-1202.

    PubMed CAS PubMed Central Google Scholar

  • 68.

    Повлсен К., Торсен П., Линд I. Связь биоваров Ureaplasma urealyticum с наличием или отсутствием бактериального вагиноза у беременных женщин и временем родов. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2001, 20 (23): 65-67.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 69.

    Делчер А.Л., Хармон Д., Касиф С., Уайт О, Зальцберг С.Л.: Улучшенная идентификация микробных генов с помощью GLIMMER. Nucleic Acids Res. 1999, 27 (23): 4636-4641.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 70.

    Гриффитс-Джонс С., Бейтман А., Маршалл М., Ханна А., Эдди С.Р .: Rfam: база данных семейства РНК. Nucleic Acids Res. 2003, 31 (1): 439-441.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 71.

    Lowe TM, Eddy SR: tRNAscan-SE: программа для улучшенного обнаружения генов транспортной РНК в геномной последовательности.Nucleic Acids Res. 1997, 25 (5): 955-964.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 72.

    Laslett D, Canback B: ARAGORN, программа для обнаружения генов тРНК и генов тмРНК в нуклеотидных последовательностях. Nucleic Acids Res. 2004, 32 (1): 11-16.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 73.

    Selengut JD, Haft DH, Davidsen T, Ganapathy A, Gwinn-Giglio M, Nelson WC, Richter AR, White O: TIGRFAM и свойства генома: инструменты для определения молекулярных функций и биологических процессов в прокариотических геномах .Nucleic Acids Res. 2007, 35 (выпуск базы данных): D260-D264.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 74.

    Эшбернер М., Болл С.А., Блейк Дж. А., Ботштейн Д., Батлер Н., Черри Дж. М., Дэвис А. П., Долински К., Дуайт С. С., Эппиг Дж. Т. и др.: Онтология генов: инструмент для объединения биологии. Консорциум генных онтологий. Нат Жене. 2000, 25 (1): 25-29.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 75.

    Хафт Д.Х., Селенгут Д.Д., Бринкак Л.М., Зафар Н., Уайт О: Свойства генома: система для исследования генетического содержания прокариот для микробиологии, аннотации генома и сравнительной геномики. Биоинформатика. 2005, 21 (3): 293-306.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 76.

    [http://manatee.sourceforge.net/index.shtml],

  • 77.

    Crabtree J, Angiuoli SV, Wortman JR, White OR: Sybil: методы и программное обеспечение для множественного сравнения геномов и визуализация.Методы Мол биол. 2007, 408: 93-108.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 78.

    Laing C, Buchanan C, Taboada EN, Zhang Y, Kropinski A, Villegas A, Thomas JE, Gannon VP: Анализ последовательности пангенома с использованием Panseq: онлайн-инструмента для быстрого анализа основных и дополнительных геномов регионы. BMC Bioinforma. 2010, 11: 461-

    Статья Google Scholar

  • 79.

    Гельфанд Ю., Родригес А., Бенсон Г.: TRDB — База данных тандемных повторов. Nucleic Acids Res. 2007, 35 (1-2): D80-D87.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 80.

    Чжан З., Шварц С., Вагнер Л., Миллер В. Жадный алгоритм для выравнивания последовательностей ДНК. J Comput Biol. 2000, 7 (1-2): 203-214.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 81.

    Sonnhammer EL, Durbin R: матричная программа с динамическим пороговым контролем, подходящая для анализа геномной ДНК и последовательности белков. Ген. 1995, 167 (1-2): GC1-GC10.

    PubMed CAS Google Scholar

  • 82.

    Альтшул С.Ф., Мэдден Т.Л., Шаффер А.А., Чжан Дж., Чжан З., Миллер В., Липман Д.Д.: Gapped BLAST и PSI-BLAST: новое поколение программ поиска в базе данных белков. Nucleic Acids Res. 1997, 25 (17): 3389-3402.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 83.

    Wu J, Xie J: Скрытая марковская модель и ее применение в поисках мотивов. Методы Мол биол. 2010, 620 (2010): 405-416.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 84.

    Finn RD, Mistry J, Tate J, Coggill P, Heger A, Pollington JE, Gavin OL, Gunasekaran P, Ceric G, Forslund K и др.: База данных по семействам белков Pfam. Nucleic Acids Res. 2010, 38 (выпуск базы данных): D211-D222.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • 85.

    Larkin MA, Blackshields G, Brown NP, Chenna R, McGettigan PA, McWilliam H, Valentin F, Wallace IM, Wilm A, Lopez R, et al: Clustal W и Clustal X version 2.0. Биоинформатика. 2007, 23 (21): 2947-2948.

    PubMed CAS Статья Google Scholar

  • 86.

    Huson DH, Richter DC, Rausch C, Dezulian T, Franz M, Rupp R: Dendroscope: интерактивный просмотрщик больших филогенетических деревьев. BMC Bioinformatics. 2007, 8: 460-

    PubMed PubMed Central Статья Google Scholar

  • 87.

    Waterhouse AM, Procter JB, Martin DM, Clamp M, Barton GJ: Jalview Version 2 — редактор множественного выравнивания последовательностей и инструментальные средства анализа. Биоинформатика. 2009, 25 (9): 1189-1191.

    PubMed CAS PubMed Central Статья Google Scholar

  • Уреаплазма … приводит к БВ или нет?

    Узнайте больше о скрытом виновнике, пока доктор Гупта разговаривает с Byrdie.com….

    Что такое уреаплазма?

    « Уреаплазма — это бактерий, которые обычно встречаются во влагалищных выделениях сексуально активных женщин », — объясняет Гупта.Чтобы быть более конкретным, Ureaplasma является подвидом Mycoplasma, бактерии, которая обитает на слизистых оболочках. (Другие типы микоплазм вызывают распространенные заболевания, такие как ходячая пневмония.) Без лечения инфекция Ureaplasma может привести к хроническому дискомфорту, воспалительным заболеваниям органов малого таза и даже к осложнениям во время беременности.

    Насколько распространены бактерии уреаплазмы?

    Самым удивительным, что я узнал о Ureaplasma , является то, что, несмотря на свою неизвестность, это заболевание далеко не редкость: по словам Гупты, бактерии «чрезвычайно распространены».Она уточняет: «К зрелому возрасту Ureaplasma — это то, что, несмотря на свою неясность, этот недуг встречается далеко не редко: по словам Гупты, бактерии« чрезвычайно распространены ». Она уточняет: «К зрелому возрасту примерно 80% здоровых женщин имеют Ureaplasma spp. в их выделениях из шейки матки или влагалища . Распространенность увеличивается с увеличением сексуальной активности ». Ага, это 80% .

    Стоит отметить, что, хотя инфекция Ureaplasma может вызвать серьезные проблемы со здоровьем влагалища, у здоровых женщин обычно присутствует около Ureaplasma бактерий во влагалище.В конце концов, наши нижние регионы представляют собой хрупкие экосистемы — только когда эти флоры выходят из равновесия, мы чувствуем себя плохо. Гупта поясняет: «В большинстве случаев Ureaplasma не вызывает никаких симптомов. Однако в редких случаях «хорошие» бактерии, такие как Lactobacilli и Acidophilli , могут оказаться в меньшинстве «не очень хороших» бактерий, таких как Ureaplasma ».

    Каковы симптомы инфекции уреаплазмы?

    Как я уже писал выше, наиболее характерным признаком моего опыта с инфекцией Ureaplasma было то, что она не была похожа ни на какие другие болезни, которые я испытал; в основном это была аура раздражения, которая переросла в ощущение полного жжения после секса или когда мне действительно нужно было в туалет.Гупта добавляет, что некоторые общие симптомы инфекции Ureaplasma : « зеленоватые выделения, рыбный запах и / или вагинальный зуд . Важно отметить, что эти симптомы обычно вызваны бактериальным вагинозом или трихомониазом ». Короче говоря, избыток Ureaplasma может привести к другим проблемам репродуктивного здоровья с более очевидными симптомами.

    Почему обычно не проходят тесты на уреаплазму?

    Возможно, самой неприятной частью моей многолетней медицинской одиссеи было то, сколько времени потребовалось, чтобы поставить диагноз.По-видимому, объясняет Гупта, на самом деле есть несколько веских причин, по которым врачи не включают бактерии Ureaplasma в стандартные гинекологические исследования. «Во-первых, эта бактерия невероятно распространена среди сексуально активных женщин», — объясняет она. «Во-вторых, что более важно, существует мало — если вообще есть — существенных доказательств того, что Ureaplasma является виновником болезненных вагинальных инфекций».

    Это не означает, что Ureaplasma безвредна.Вместо этого, идея состоит в том, что Ureaplasma открывает двери для дрожжевых инфекций, ИМП и бактериального вагиноза , поэтому часто имеет смысл просто лечить эти заболевания. Во время моего визита в офис моя практикующая медсестра объяснила, что Ureaplasma , скорее всего, была основной причиной моих рецидивов BV и UTI; без уничтожения в моей репродуктивной системе бактерий Ureaplasma , даже самые сильные средства от этих других болезней не прижились бы. Как говорится на ресурсе информации о здоровье Колумбийского университета Go Ask Alice: «Ureaplasma urealyticum (UUR) — это распространенная инфекция, передающаяся половым путем, которая часто не вызывает симптомов, но может поражать урогенитальный тракт.”

    Что делать, если вы подозреваете, что у вас инфекция уреаплазмы?

    «Ваш гинеколог может запросить тест на Ureaplasma с помощью вагинального мазка или мазка Папаниколау, если вы чувствуете, что у вас есть симптомы», — говорит Гупта. Поскольку у всех бактерий Mycoplasma отсутствуют клеточные стенки, они устойчивы к обычным антибиотикам и требуют специального лечения по рецепту.

    Что касается предотвращения, Гупта утверждает, что контроль является ключевым: « Ureaplasma нельзя полностью предотвратить, но можно контролировать.Лучший способ контролировать это — поддерживать здоровую флору влагалища. Здоровая микрофлора влагалища может поддерживаться , принимая качественные пробиотики в высоких дозах и избегая спринцеваний или медикаментозных промывок влагалища ».

    Пока мой строгий режим приема специальных антибиотиков творил чудеса, я искала временного облегчения в горячих ваннах с натуральным мега-нежным мылом. Моя практикующая медсестра также посоветовала мне отказаться от сахара в течение нескольких недель, чтобы облегчить любое воспаление в этой области. это требование я сначала посчитал невозможным, а также безумным.Однако несколько недель спустя я должен признать, что она могла быть права.

    Наконец, Гупта добавляет: «Прилежание к гигиене половых органов также является ключевым моментом — если вы весь день были на пляже или только что тренировались, вам следует сразу же принять душ. Также важно избегать слишком тесной одежды и ношения хлопкового нижнего белья ».

    Полная ссылка здесь.

    http://www.byrdie.com/ureaplasma/

    Ureaplasma urealyticum — индуцированная продукция провоспалительных цитокинов макрофагами

    Культура клеток

    Линия клеток.

    Линия моноцитарных клеток человека (THP-1; American Type Culture Collection, Rockville, MD, USA) поддерживалась в среде RPMI 1640 (Sigma Chemical Co, Сент-Луис, Миссури, США) с добавлением 2 мМ l-глутамина ( Sigma), 5 мМ меркаптоэтанола, 10 мМ HEPES (GibcoBRL, Гейтерсбург, Мэриленд, США) и 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки Myclone (GibcoBRL) при 37 ° C, 5% CO 2 . Перед использованием клетки их разделяли и высевали в свежую среду на 48 часов, а затем дифференцировали с помощью PMA (Sigma) при 10 -8 M с 5 × 10 5 клеток / мл во флаконах с тефлоновым покрытием в течение 48 часов.Для подтверждения популяции макрофагов был проведен анализ проточной цитометрии. Экспрессия макрофаг-специфических антигенов клеточной поверхности показала, что 96,2% клеток экспрессировали CD14 и CD45, а 99,9% клеток экспрессировали HLA-DR, что указывает на полную дифференцировку макрофагов. Клеточная линия альвеолярных макрофагов крысы (Nr8383) (Американская коллекция типовых культур) поддерживалась в среде Хэма F-12 (GibcoBRL) с добавлением 15% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки Myclone (GibcoBRL).

    Макрофаги TAF человека.

    Макрофаги легких недоношенных новорожденных были получены от четырех пациентов, получавших искусственную вентиляцию легких. Клинические данные для пациентов показаны в таблице 1. Аспираты получали в те моменты, когда обычное эндотрахеальное отсасывание выполняли следующим образом: 0,5 мл 0,9% физиологического раствора закапывали в эндотрахеальную трубку. Затем младенца снова подключили к аппарату искусственной вентиляции легких. После отключения вентилятора отсасывающий катетер вводили за кончик эндотрахеальной трубки.Затем во время извлечения катетера выполнялась аспирация. После этого катетер промывали еще 0,5 мл 0,9% физиологического раствора в стерильную ловушку для образцов. Затем TAF фильтровали через специальный фильтр для клеток (Falcon, Franklin Lakes, Нью-Джерси, США) и центрифугировали, а супернатант отбрасывали. Затем клетки культивировали в 96-луночных планшетах (Costar, Кембридж, Массачусетс, США) при 5 × 10 5 клеток / мл в среде RPMI 1640 с 2 мМ l-глутамином, 10% термоинактивированной фетальной телячьей сывороткой Myclone ( GibcoBRL) и пенициллин (100 Ед / мл) –стрептомицин (100 мкг / мл; Sigma).Макрофаги оставляли прилипать к пластику во время 2-часовой предварительной инкубации при 37 ° C, 5% CO 2 , и супернатант вместе с неадгезивными клетками отбрасывали. Эта часть исследования была одобрена этическим комитетом Каролинской больницы, и родители дали свое информированное согласие.

    Таблица 1 Клинические данные пациентов, у которых был получен TAF. Сокращения: GA, гестационный возраст; BW — масса тела; РДС, респираторный дистресс-синдром.

    Приготовление

    U.

    urealyticum antigen

    Стандартный штамм 8 серотипа U. urealyticum (T960; ATCC) культивировали при 37 ° C в 1,5 л бульонной среды Ureaplasma , содержащей 22,5 г / л триптиказо-соевого бульона; 16,5% лошадиной сыворотки; 7,5% 25% свежего дрожжевого экстракта; 0,36% мочевины; 380 000 Ед / л пенициллина G; и феноловый красный. Клетки собирали в поздней логарифмической фазе центрифугированием при 30 000 × 91 109 g в течение 90 мин при 4 ° C. Осадок трижды промывали ресуспендированием в PBS и центрифугировали, как указано выше, в течение 30 мин.После последней промывки Ureaplasma ресуспендировали в общем объеме 2 мл PBS. Количество CCU концентрированной суспензии определяли дважды 10-кратным титрованием в бульоне Ureaplasma . Оставшуюся суспензию U. urealyticum убивали нагреванием путем инкубации на водяной бане при 56 ° C в течение 20 минут. Полное уничтожение было гарантировано инкубацией 25 мкл суспензии на агаре Ureaplasma , а также инкубацией в бульоне Ureaplasma без добавления мочевины и последующей субкультивацией на агаре на 1, 3 и 7 день.Последнюю процедуру использовали, поскольку убитая нагреванием суспензия U. urealyticum вызвала быстрое изменение цвета в бульоне Ureaplasma из-за активности уреазы. Антиген U. urealyticum хранили при -80 ° C в аликвотах по 0,1 мл до использования.

    Стимуляция антигеном

    Макрофаги человека и крысы из клеточных линий распределяли в 24-луночные планшеты в концентрации 1 × 10 6 клеток / мл и стимулировали 100 нг / мл LPS (Sigma) или 4 × 10 От 6 до 4 × 10 8 CCU / мл U.urealyticum в течение 24 ч при 37 ° C и 5% CO 2 . Для анализа мРНК крысиного IL-6 и TNF-α стимуляцию продолжали в течение 4 часов. В качестве контроля те же клетки инкубировали только со средой. Все эксперименты повторяли от четырех до шести раз. Стимуляцию макрофагов TAF человека проводили антигеном U. urealyticum (4 × 10 8 CCU / мл) и только средой в течение 24 ч при 37 ° C и 5% CO 2 .

    Анализ цитокинов

    Все супернатанты собирали после стимуляции и хранили при -70 ° C для анализа цитокинов.Наборы ELISA для человеческого TNF-α, IL-6 и крысиного TNF-α были получены от R&D System (Abingdon, Oxon, UK). Супернатанты использовали для определения цитокинов методом количественного «сэндвича» ELISA с использованием моноклональных антител, специфичных для тестируемых цитокинов. Пределы обнаружения человеческого IL-6 и TNF-α и крысиного TNF-α составляют 0,7, 4,4 и 10 пг / мл соответственно.

    Специфический биоанализ

    Анализ биоактивности крысиного IL-6 проводили с помощью специфического биоанализа с использованием IL-6-зависимой клеточной линии — линии гибридомы 7TD1, как описано ранее ( 17 ).Вкратце, клетки росли в среде IL-6, а затем перед экспериментом клетки голодали с меньшим количеством IL-6. Жизнеспособность клеток составляла 70–95%. Затем клетки ресуспендировали в среде без ИЛ-6 до 20000 клеток / мл, и 100 мкл этой суспензии добавляли к серийным разведениям образцов в том же объеме. Рекомбинантный мышиный IL-6 (Genzyme; Novakemi AB, Стокгольм, Швеция) использовали в качестве стандарта. Через 72 часа при 37 ° C в инкубации с 5% CO 2 в культуры пульсировали 1 мкКи [ 3 H] тимидина в 10 мкл физиологического раствора, а затем инкубировали в течение 6 часов.Затем культуру собирали на полоски из стекловолокна. Полоски фильтра сушили и перфорировали во флаконы, и добавляли сцинтилляционную жидкость. Определена радиоактивность. Расчет концентрации IL-6 в образцах производился по стандартной кривой.

    RT-PCR

    Общая РНК была экстрагирована из 4 × 10 6 клеток с помощью RNAzolB (Biotecx Laboratories; Хьюстон, Техас, США) после различных обработок. Клетки суспендировали в 1 мл ледяной RNAzolB, и общую РНК экстрагировали в соответствии с инструкциями производителя.Конечный осадок РНК сушили на воздухе и ресуспендировали РНК в 20 мкл воды, обработанной диэтилпирокарбонатом; 10 мкл использовали для спектрофотометрического определения концентрации РНК при 260 нм, а качество определяли путем оценки профиля 230–320 нм. Оставшиеся 10 мкл хранили при -70 ° C.

    Синтез первой цепи кДНК общей РНК осуществляли с использованием SuperScript RNase H обратной транскриптазы (GibcoBRL) и случайных гексамерных праймеров [pd (N) 6 ; Amersham Pharmacia Biotech, Упсала, Швеция].Вкратце, 1 мкг РНК вместе со 100 пмоль pd (N) 6 нагревали при 70 ° C в течение 10 мин; затем добавляли 0,1 ммоль DTT, 10 мкмоль dNTP, 60 ед. RNasin (Boehringer Mannheim, Mannheim, Германия) и 300 ед. надстрочного индекса, и смесь инкубировали при 45 ° C в течение 2 часов.

    Были синтезированы специфические олигонуклеотидные праймеры для человеческого IL-6, человеческого TNF-α (Scandinavian Gene Synthesis, Köping, Швеция) и гена домашнего хозяйства человека G3PDH (CyberGene AB, Huddinge, Швеция). Праймеры крысиного IL-6, TNF-α и G3PDH были получены от Innovagen (Лунд, Швеция).Последовательности используемых 3′- и 5′-праймеров показаны в Таблице 2.

    Таблица 2 Праймеры, используемые в реакциях ОТ-ПЦР

    ПЦР с использованием полимеразы Taq (конечная концентрация 0,025 Ед / мкл; GibcoBRL) выполняли в конечном объеме 25 мкл, содержащем 2 мкл кДНК для TNF-α и G3PDH и 4 мкл для IL-6, в ДНК-термоциклере 480 (Perkin Elmer, Norwalk, CT, USA). Другие компоненты реакции включали MgCl 2 (2 мМ), dNTP (0,2 мМ), буфер для ПЦР и 3′- и 5′-праймеры (0.По 5 мкМ). ПЦР проводили для 40 циклов для человеческого IL-6, для 35 циклов для человеческого TNF-α и для 27 циклов для человеческого G3PDH в следующих условиях: денатурация в течение 1 мин при 94 ° C; 1 мин отжиг при 54 ° C для человеческого IL-6, при 56 ° C для человеческого TNF-α и при 60 ° C для человеческого G3PDH; и удлинение в течение 1 мин при 72 ° C, затем окончательное удлинение в течение 5 мин при 72 ° C и охлаждение до 4 ° C. ПЦР проводили в течение 40 циклов для крысиного IL-6 и крысиного TNF-α с 1 мин при 94 ° C, 30 с при 54 ° C для крысиного IL-6 и при 58 ° C для крысиного TNF-α и 3 мин при 72 ° С; и для 35 циклов для крысиного G3PDH с 1 мин при 94 ° C, 1 мин при 60 ° C и 1 мин при 72 ° C, с последующим окончательным удлинением в течение 5 мин при 72 ° C и охлаждением до 4 ° C.

    Продукты ПЦР разделяли на 1,5% агарозном геле (GibcoBRL). Гель, окрашенный бромидом этидия, фотографировали в УФ-свете с помощью цифровой зум-камеры DC120 (Eastman Kodak Company, Рочестер, штат Нью-Йорк, США), и чистую интенсивность продуктов ПЦР анализировали с помощью системы документации и анализа электрофореза Kodak Digital Science 120. (Истман Кодак).

    Анализ данных

    Данные ELISA и биоанализа из объединенных экспериментов были представлены как средние значения и 95% доверительный интервал.Данные анализировали с помощью теста t или однофакторного дисперсионного анализа. Парные данные о ненормальности были проанализированы с помощью теста пар Уилкоксона.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *